為提高SARS-CoV-2檢測陽性率需注意以下幾點(diǎn):
(1)防止標(biāo)本中病毒RNA降解。標(biāo)本采集過程中應(yīng)避免觸碰到除患者扁桃體及咽喉壁以外的其他部位,采集后應(yīng)于2~4h內(nèi)盡快將標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室;2°C~8°C保存條件下轉(zhuǎn)運(yùn)的標(biāo)本運(yùn)送時(shí)間不得超過72h,若轉(zhuǎn)運(yùn)超過72h的標(biāo)本則應(yīng)低于-70°C保存。
(2)多部位同時(shí)采樣。本研究中部分患者多次鼻拭子、咽拭子檢測均陰性,痰檢陽性。病毒核酸檢測陽性率最高的標(biāo)本為肺泡灌洗液,其次依序?yàn)檎T導(dǎo)深部咳痰標(biāo)本、鼻咽拭子、咽拭子,然而對(duì)于無氣管插管患者不主張進(jìn)行肺泡灌洗。根據(jù)《新型冠狀病毒肺炎病毒核酸檢測專家共識(shí)》標(biāo)本采集優(yōu)選順序?yàn)楸茄适米?、咽拭子、痰,可同時(shí)采集多部位標(biāo)本以提高陽性率。感染患者糞便標(biāo)本中也可檢測出病毒,已有學(xué)者提出糞便取樣方便、標(biāo)本量大,呼吁重視糞便檢測SARS-CoV-2的臨床價(jià)值。
(3)多部門同時(shí)檢測。多個(gè)實(shí)驗(yàn)室同時(shí)檢測也是降低核酸檢測假陰性的方法之一。不同實(shí)驗(yàn)室RT-PCR檢測SARS-CoV-2的引物、探針設(shè)計(jì)可能不同,針對(duì)的靶標(biāo)(ORF1ab、N或E結(jié)構(gòu)蛋白)組合也不盡相同,多個(gè)實(shí)驗(yàn)室同時(shí)檢測能有效防止因檢測試劑及操作人員等因素造成的假陰性結(jié)果。此外,已有報(bào)道證實(shí),該病毒存在變異,不同檢測方法,尤其是進(jìn)行核酸測序,是降低核酸檢測假陰性的可靠手段。本研究中部分病例標(biāo)本在本院檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測的同時(shí)也將標(biāo)本送至其他實(shí)驗(yàn)室行RT-PCR甚至核酸測序檢測。
(4)檢測血清新型冠狀病毒抗體。研究報(bào)道,對(duì)一組入院治療的患者連續(xù)10d監(jiān)測其體內(nèi)病毒抗體免疫球蛋白M(im-munoglobulinM,IgM)和免疫球蛋白G(immuno-globulinG,IgG)的滴度,發(fā)現(xiàn)在入院當(dāng)天患者的IgM和IgG抗體滴度表達(dá)均處于低水平甚至檢測不到,而入院后第5天幾乎所有患者都出現(xiàn)了以上兩種抗體表達(dá)的增高,IgM陽性率從50%(8/16)增至81%(13/16),而IgG從81%(13/16)增至100%(16/16)。目前,國內(nèi)雖尚未普及針對(duì)SARS-CoV-2抗體的檢測,但隨著檢測技術(shù)的進(jìn)步,血清學(xué)檢測同樣也將成為確診病毒感染的重要方法。