豬鼻拭子采集的標準操作流程

2022-01-10 21:22:05

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1、鼻拭子采集標準操作流程的確定實驗員蹲于豬的左側，左手抓緊實驗豬的上下鄂，使豬嘴緊閉，右臂肘部與右腿將實驗豬頸部夾住，對其進行固定。當實驗豬情緒穩(wěn)定后，右手持棉簽，將棉簽與豬鼻中隔成45°角輕輕插入，遇到鼻中隔后，稍作拐彎，繞過骨狀辨膜，與鼻中隔平行方向插入約2cm。輕輕轉動棉簽，刺激實驗豬的噴嚏反射，當打2~3個噴嚏后，輕輕拔出棉簽，放入1mL樣品貯存液中，折斷多余部分的棉棒，密閉收集管，標號后于4°C保存。

如果鼻拭子采集失敗如鼻拭子掉落、鼻拭子上有明顯血跡等，則需要重新采集。重新采集則需從另一個鼻孔進行操作，采集方法見圖。

2、鼻拭子處理標準操作流程的確定將收集的鼻拭子浸液在4°C過夜。第二天，在渦旋振蕩器上震蕩5s后，用1mL移液器盡量吸出鼻拭子浸液，10000r/min，離心5min，取上清，-20°C，保存?zhèn)溆谩?/p>

3、樣品穩(wěn)定性測定采用BCA蛋白濃度檢測試劑盒檢測各鼻拭子樣本中的總蛋白濃度，通過各樣本之間變異系數(shù)來確定該方法的穩(wěn)定性。